RESUMO: O objetivo deste estudo foi avaliar se o teste do anel do leite (TAL), utilizado para o diagnóstico da brucelose em nível de rebanho leiteiro, pode ser realizado em amostras de leite com conservador (Bronopol®) coletado para contagem de células somáticas (CCS) que é utilizado para monitoramento de mastite. Foram analisadas 38 amostras de leite de tanques de expansão (ALTE) de 19 rebanhos leiteiros produtores de queijo artesanal e 36 ALTE de rebanho leiteiro livre de brucelose, utilizadas como controle negativo (CN) e controle positivo (CP), quando foi adicionado soro de animais vacinados. As amostras de leite foram coletadas em dois frascos diferentes (com e sem Bronopol®). Todos as 38 ALTE de produtores artesanais de queijo (amostras com e sem Bronopol®) foram não reagentes ao TAL, como todos os CN. Todos os CP foram reagentes ao TAL, sem interferência do Bronopol®. Os resultados mostraram que a amostra de leite utilizada para CCS apresentaram a proporção de concordância dos resultados em todas as amostras de leite (100%), ou seja, não foram observados resultados falso-positivos e falso-negativos. Os resultados indicam que o Bronopol® não interferiu na cor no momento da leitura do TAL, sugerindo que as mesmas amostras de leite poderiam ser usadas para monitorar mastite e brucelose.

ABSTRACT: This study evaluated if the milk ring test (MRT) used to the brucellosis diagnostic at dairy herd level can be done in milk samples with conservative (Bronopol®) collected to the somatic cell count (SCC) that is used to mastitis monitoring. It were analyzed 38 bulk tank milk samples (BTMS) from 19 dairy herds artisanal cheese producers and 36 BTMS from a brucellosis free dairy herd, used as negative control (NC) and positive control (PC), when was added serum from vaccinated animals. The milk samples were collected in two different bottles (with or without Bronopol®). All the 38 BTMS from artisanal cheese producers (samples with and without Bronopol®) were non-reagent to MRT, as all NC. All PC were reagent to MRT, without interference of Bronopol®. Results showed that the milk sample used to SCC presented the proportion of agreement of results in all milk samples (100%), that is, false positive and false negative results were not observed. Results indicated that Bronopol® did not interfere with the color in the time of MRT reading suggesting that the same milk samples could be used to monitoring mastitis and brucellosis.

RESUMO: Contagens de células somáticas de tanque (BTSCC) são amplamente utilizadas para monitorar a saúde da glândula mamária em níveis regional e de rebanho. Séries temporais de BTSCC, de regiões ou países específicos, podem ser usadas para comparar a saúde da glândula mamária e estimar a tendência de mastite subclínica em nível regional. Três séries temporais de BTSCC de rebanhos leiteiros, localizados nos EUA e na região sudeste do Brasil, foram avaliadas de 1995 a 2014. A estatística descritiva e modelos de regressão linear foram usados para avaliar as informações das séries temporais de BTSCC. A média anual geométrica de BTSCC (AGM) e a porcentagem de rebanhos com BTSCC, maior que 400.000 células mL-1 (%>400), foram significantemente diferentes (P<0,05) de acordo com os países e as séries temporais analisadas. O modelo de regressão linear usado para as séries temporais dos EUA foram estatisticamente significantes para AGM e %>400 (P<0,05). A primeira e a segunda séries temporais dos EUA apresentaram uma tendência de aumento e diminuição, tanto para AGM quanto para %>400, respectivamente. O modelo de regressão linear para as séries temporais do Brasil não foi significante (P>0,05) para ambas as variáveis dependentes (AGM e %>400). As séries temporais do Brasil não apresentaram tendência de aumento ou diminuição para AGM e %>400. Consequentemente, aproximadamente, 40 a 50% dos rebanhos leiteiros do sudeste do Brasil não alcançarão os limites regulatórios para BTSCC ao longo dos próximos anos.

ABSTRACT: Bulk tank somatic cell counts (BTSCC) is widely used to monitore the mammary gland health at the herd and regional level. The BTSCC time series from specific regions or countries can be used to compare the mammary gland health and estimate the trend of subclinical mastitis at the regional level. Three time series of BTSCC from dairy herds located in the USA and the Southeastern Brazil were evaluated from 1995 to 2014. Descriptive statistics and a linear regression model were used to evaluate the data of the BTSCC time series. The mean of annual geometric mean of BTSCC (AGM) and the percentage of dairy herds with a BTSCC greater than 400,000 cells mL-1 (%>400) were significantly different (P<0.05) according to the countries and the times series. Linear regression model used for the USA time series was statistically significant for AGM and the %>400 (P<0.05). The first and second USA time series presented an increasing and decreasing trend for AGM and the %>400, respectively. The linear regression model for the Brazil time series was not significant (P>0.05) for both dependent variables (AGM and %>400). The Brazil time series showed no increasing or decreasing trend for the AGM and %>400. Consequently, approximately 40 to 50% of the dairy herds from southeastern Brazil will not achieve the regulatory limits for BTSCC over the next years.

As aves são consideradas o principal reservatório de Campylobacter spp., um importante patógeno para humanos e muitos estudos têm relatado uma rápida seleção de cepas resistentes às fluoroquinolonas após o uso destes antimicrobianos na produção avícola e na medicina humana. O principal mecanismo de resistência às fluoroquinolonas em Campylobacter consiste na mutação na Região Determinantes de Resistência às Quinolonas (RDRQ) do gene gyrA, que codifica para a subunidade A da enzima DNA girase, alvo das fluoroquinolonas. O objetivo deste estudo foi investigar a mutação na RDRQ do gene gyrA em cepas de Campylobacter previamente isolados de carcaças de frangos de corte e fezes de galinhas poedeiras. Foram selecionadas 38 cepas de C. jejuni e 19 cepas de C. coli (n=57), previamente caracterizadas como resistentes à ciprofloxacina e enrofloxacina, pelo método da difusão em disco e pela determinação da concentração inibitória mínima. Para detecção da mutação, foi utilizado sequenciamento direto de um fragmento de 454pb da RDRQ do gene gyrA gerado por PCR. Todas as cepas apresentaram a mutação na RDRQ do gene gyrA no códon 86 (Tre-86-Ile), que confere resistência às fluoroquinolonas e outras mutações silenciosas foram observadas. A caracterização genotípica da resistência às fluoroquinolonas em Campylobacter confirmou a prévia detecção fenotípica dessa resistência e a mutação Tre-86-Ile foi observada na totalidade das amostras, comprovando ser esta a mutação predominante em cepas de C. jejuni e C. coli resistentes à enrofloxacina e ciprofloxacina.

Poultry are considered to be the main reservoir of Campylobacter spp. bacteria, an important pathogen for humans. Many studies have reported a rapid selection of fluoroquinolone-resistant strains following the widespread use of these antimicrobials in poultry production and human medicine. The main mechanism of fluoroquinolone resistance in Campylobacter is a mutation in the Quinolone Resistance Determinant Region (QRDR) in the gyrA gene, which codes for the subunit of the enzyme DNA gyrase, the target for fluoroquinolone. The aim of this study was to investigate the mutation in QRDR in the gyrA gene of Campylobacter strains previously isolated from broiler carcasses and feces of laying hens. Thirty-eight strains of C. jejuni and 19 C. coli strains (n=57), previously characterized as resistant to ciprofloxacin and enrofloxacin by the disk diffusion method and minimum inhibitory concentration (MIC), were selected. For detection of the mutation, a fragment of 454pb QRDR in the gyrA gene was used for direct sequencing. All strains presented the QRDR mutation in the gyrA gene at codon 86 (Thr-86-Ile), which confers resistance to fluoroquinolones. Other known silent mutations were observed. This genotypic characterization of fluoroquinolone resistance in Campylobacter strains has confirmed the prior phenotypic detection of the resistance. The Thr-86-Ile mutation was observed in all samples confirming that this is the predominant mutation in enrofloxacin and ciprofloxacin resistant strains of C. jejuni and C. coli.

O objetivo deste trabalho foi comparar a análise individual (plano de duas classes) e a análise por lotes (plano de três classes), priorizado pelo plano amostragem oficial da ANVISA, na influência do pré-resfriamento de carcaças de frangos de corte na redução da contaminação por coliformes termotolerantes. Foram analisadas 240 carcaças de frangos de corte, sendo coletadas 120 amostras antes e 120 após a etapa de pré-resfriamento, para quantificação de coliformes termotolerantes pela técnica de contagem em placas. As médias das contagens obtidas das carcaças coletadas antes e após o pré-resfriamento foram diferentes, com uma redução média de 0,99log10 UFC g-1 de coliformes termotolerantes. Na interpretação dos resultados obtidos antes do pré-resfriamento pela análise individual, 16,7% (20/120) das carcaças foram classificadas como inaceitáveis, enquanto, pela análise por lotes, foram 37,5% (45/120). Houve associação entre a aceitabilidade dos lotes e a passagem pelo chiller com um valor de Odds Ratio de 35,48. Ficou demonstrada a importância da utilização do plano de análise por lotes e da etapa de pré-resfriamento no processo de produção, sendo decisivos para a aceitação dos lotes de carcaças de aves para comercialização pelos parâmetros vigentes na legislação nacional.

The objective of this study was to assess the influence of immersion chilling on broiler carcasses contamination by fecal coliforms counting in a poultry slaughterhouse under Federal Sanitary Inspection by individual and three class plan interpretation of the results. Two hundred and forty broiler carcasses, being collected 120 before and 120 after passage thought chillers, were analyzed for coliform counting by plate count technique. The averages of the counts obtained from all carcasses collected before and after immersion chilling were different, with an average reduction of 0.99log10 CFU g-1 of fecal coliforms. Regarding individual results (two class plan) before chilling, 16.7% (20/120) of the carcasses were classified as unacceptable, against 37.5% (45/120) regarding lots results (three class plan). There was a strong association between the acceptability of lots and immersion chilling with an Odds Ratio value of 35.48. It was demonstrated the importance of the official sampling plan and immersion chilling in the production process, being decisive for the acceptance of the chicken carcass lots by the national legislation standards.

Trinta e nove touros provenientes de propriedades de pecuária leiteira (n=9) e de pecuária de corte (n=30), situadas na região do Médio Paraíba, Rio de Janeiro (RJ), foram investigados para a presença de Campylobacter fetus e Tritrichomonas foetus. Para a pesquisa de Campylobacter, amostras de esmegma foram coletadas e submetidas à técnica de cultivo e isolamento e amostras de lavado prepucial ao teste de Imunofluorescência Direta (IFD). Para a pesquisa de Tritrichomonas, foi utilizada a técnica de exame direto a partir de lavado prepucial. Foi observada a presença de C. fetus em 14 amostras (35,9 %), por meio da IFD, e o isolamento de C. fetus, subespécie venerealis, foi obtido a partir de quatro amostras (10,3%). T. foetus não foi identificado nas amostras investigadas. A alta freqüência de C. fetus observada nos animais investigados sugere a presença da campilobacteriose na região do Médio Paraíba, em rebanhos com problemas reprodutivos.

Thirty nine breeding bulls from dairy farms (n=9) and beef farms (n=30) located in Médio Paraíba region at Rio de Janeiro - Brazil state were investigated for the presence of Campylobacter fetus and Tritrichomonas foetus. For Campylobacter investigation, smegma samples were examined by culture and prepucial washings were examined by direct immunofluorescence technique (DIF). The prepucial washings were also examined for Tritrichomonas foetus presence by direct examination. C. fetus was identified in 14 samples (35.9 %) by DIF technique and C. fetus subspecies venerealis was isolated from four samples (10.3%). T. foetus was not detected in bull samples. The high frequency of C. fetus observed in bull samples suggests the occurrence of Campylobacteriosis among herds which have reproductive problems at the Médio Paraíba region.